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Sigma胎牛血清F2442
血清含有豐富的生長因子可促進細胞的繁殖,含有附著因子可促進細胞的貼壁,同時也是礦物質、脂類及激素的來源。因此,細胞培養中普遍需要添加血清,而血清也成為對細胞的生長繁殖發揮重要作用的關鍵因素,血清的質量直接影響著細胞的生長狀態。
一款好的血清決定細胞寶寶健康成長的關鍵因素,血清的質量主要取決于兩個因素:原產地和生產加工過程:
原產地
血清是一種生物制品,可能因來源動物的健康狀況而存在差異。而來源動物的健康狀況又受到飲食、環境和疾病因素的影響。源自澳大利亞的血清是*的安全血清,已經是廣泛使用于許多科研機構和生物制藥等工業生產中值得信賴的來源,并被證明可以很好地滿足科研和工業生產方面的需求。
只有從采集、加工、過濾、包裝、質檢,再到物流等生產各個環節嚴格遵循行業比較高的標準,才能確保產品的高品質。通常要求胎牛血清必須經過3次0.1微米孔徑的過濾,而其他血清均經過0.2微米孔徑的過濾。每批血清均經過嚴格的質量控制措施和理、化、微生物指標的分析檢測。
Sigma胎牛血清F2442
胎牛血清
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
2、蛋白質含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、無菌檢驗 陰性
5、支原體檢驗 陰性
6、細菌內毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106個/ml
細胞倍增時間 ≤15h
克隆率 ≥85%
— 熱滅活 —
01
目的
血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min,然后將它們分裝儲存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補體等對熱敏感的物質,以排除對免疫分析的影響。胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對商業胎牛血清中的補體成分進行測定,他們發現胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分僅有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗,我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結果。此外,多數實驗室在培養前將培養液進行預熱的過程,也對熱敏的補體有滅活的作用。因此,胎牛血清在大部分的細胞培養中是不需要滅活的,但在免疫學研究中,培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
02
負面影響
雖然熱滅活可以去除血清中的一些物質,減少免疫球蛋白的細胞毒性而不破壞多肽生長因子,但同時也會對一些血清中較不穩定的成分進行破壞,如生長因子和氨基酸。熱滅活通常會降低血清支持細胞生長的能力,并且對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生(這些沉淀主要是析出的纖維蛋白以及脂蛋白),而導致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現象后,為了驗證污染的存在或促進沉淀的溶解,許多培養者往往將血清放置37℃溫育,這將會導致情況變得更糟,因為血清中的蛋白質會進一步的析出,再次破壞血清的營養成分。而為了確定血清未被污染所進行的鏡檢,無菌培養實驗以及革蘭氏染色實驗更是浪費了實驗者大量的時間以及精力,給用戶以及供應商帶來不必要的麻煩。