源: 酵母來源
純度:>98% SDS-PAGE
內毒素水平:N/O
分子量:28.93kDa
活性測定
可以使用血紅蛋白作為底物來測量蛋白酶 K 活性
描述
蛋白酶 K 是一種蛋白酶,屬于肽酶家族 S8。該酶已廣泛表現出底物特異性,并在天然狀態下降解許多蛋白質。蛋白酶 K 被蛋白酶抑制劑(如苯 )抑制。這種酶活性不受巰基修飾試劑的影響。它在 EDTA 緩沖液中穩定。
重構
打開前短暫離心樣品瓶。建議在含有 0.1% 無內毒素重組人血清白蛋白的無菌 PBS 中重構蛋白質。
穩定性與儲存
使用手動除霜冰箱,避免反復凍融循環。一般情況下:自收貨之日起 12 個月,供貨溫度為 -20 至 -80°C。1 個月,復溶后在無菌條件下 2 至 8°C。3 個月,重構后在無菌條件下 -20 至 -80°C。
蛋白酶 K 儲備液 - 20 mg/ml (下載 PDF 格式)
指示
1) Tris-CaCl2緩沖液 PH8.0(200 mM Tris PH8.0 + 3 mM CaCl2)
量取 5 ml 不含 RNase 的 200mM Tris 緩沖液 (pH 8.0)。
添加 1.66 毫克(3 mM)氯化鈣 (CaCl2) 添加到 Tris Buffer 并溶解。
2) 5ml 儲備液 (20mg/ml)
測量 2.5 ml Tris-CaCl2將緩沖液 (pH 8.0) 放入離心管中。
添加 100 mg 蛋白酶 K (YPK-K-100GM)。
輕輕混勻以溶解蛋白酶 K。
用 0.22 μm 過濾器對溶液進行消毒。
用 100% 甘油填充至 5 ml 的最終體積(添加 2.5 ml 甘油)。
混合直至溶解。
在 -20°C 下分裝儲存 1 年。
3) 建議工作濃度:0.05~1mg/ml
注意:蛋白酶 K 與核酸酶相互作用。為確保最大的蛋白酶 K 活性,請使用經 0.1% DEPC 處理的水